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featureCounts paired-end reads detected in single-end mode

BAM 含成对 reads,但 featureCounts 参数按单端运行,或反之。

Paired-end reads were detected in single-end read library featureCounts

这个报错是什么意思?

比对数据类型与 -p/--countReadPairs 参数不匹配。

先做这三个检查

  1. 用 flagstat 确认 paired 标记比例。
  2. 按 featureCounts 版本核对 -p 和 countReadPairs 语义。
  3. 同时确认只计 fragment 还是分别计 reads。

可直接执行的检查命令

samtools view sample.bam | head
samtools flagstat sample.bam
featureCounts -p --countReadPairs -a genes.gtf -o counts.txt sample.bam

日志更长,还是定位不准?

把完整报错前后关键行贴进诊断工具,自动区分环境问题、软件问题和真实硬件瓶颈。

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